Читать реферат по медицине, физкультуре, здравоохранению: "Хемилюминесцентный анализ и его клиническое значение" Страница 3


назад (Назад)скачать (Cкачать работу)

Функция "чтения" служит для ознакомления с работой. Разметка, таблицы и картинки документа могут отображаться неверно или не в полном объёме!

показатель функционального состояния фагоцитов крови. Активность фагоцитов возрастает при наличии в организме очагов воспаления и снижается при длительном недостатке кислорода, связанном с общим ослаблением организма. Повышение спонтанной и индуцированной хемилюминесцентной активности фагоцитов наблюдается у больных с бактериальной инфекцией, опухолями, снижение - при артритах, диабете, иммунодефицитных состояниях, в т.ч. врожденной недостаточности системы комплемента.

Помимо фагоцитов, неиндуцированной (собственной) хемилюминесцентной активностью обладают клетки тимуса и лимфоциты. Механизмы хемилюминесценции лимфоцитов те же, что у фагоцитов, однако из-за более низкой активности ферментов оксидаз и оксигеназ интенсивность их свечения значительно меньше. Для инициирования свечения используются антииммуноглобулины и митогены, параметры свечения различаются в зависимости от функционального состояния лимфоцитов и потому позволяют оценивать их метаболическую активность и устойчивость к повреждениям.

Индуцированная хемилюминесценция сыворотки крови, по мнению большинства исследователей, является наиболее чувствительным и объективным методом изучения процесса перекисного окисления липидов. Реакции цепного окисления отличаются большой сложностью и включают в себя целый ряд быстропротекающих стадий. Основные участники реакций, свободные радикалы, обычными методами химического анализа определены быть не могут из-за своей крайне высокой реакционной способности и неустойчивости в биохимических системах. Поэтому регистрация интенсивности свечения в режиме реального времени представляет собой ценную информацию для анализа механизма реакций перекисного окисления липидов. [4]

Также хемилюминесцентные реакции можно использовать в иммунологических исследованиях для получения сигнала в модифицированном ИФА, при этом повышается чувствительность метода и сокращается время проведения анализа. В качестве метки в ИФА широко применяют пероксидазу хрена, для выявления которой используются такие реакции. В прямом анализе, когда метка ставится на антиген, при ферментативной реакции образуется перекись водорода и окисляет люминол, катализатором этой реакции выступает пероксидаза хрена. Для усиления сигнала используются различные соединения, например, люциферин, фенолы, в этом случае интенсивность люминесценции усиливается в 10-100 раз, в отдельных вариантах в 500 раз (усиленный хемилюминесцентный анализ). Люминесцентный сигнал очень стабилен, его уровень достигает максимума за 30 с (для сравнения: цветная реакция с ОФД в качестве индикатора полностью развивается лишь за 30 мин). При непрямом анализе люминолом или его производными метится антитело. Такая метка в свободном состоянии способна окисляться перекисью водорода с выделением света. Если она образовала комплекс, то теряет способность окисляться.

Хемилюминесцентный анализ используют для измерения содержания АТФ, и АТФ-азы, креатинкиназы, аденилатциклазы, фосфодиэстеразы, миелопероксидазы, протеолитических ферментов, ферментов монооксигеназной системы печени и др. Материалом могут выступать клеточные элементы крови (нейтрофилы, эозинофилы, лимфоциты, моноциты), плазма и сыворотка крови, моча больного. 2.Проведение методики



Интересная статья: Основы написания курсовой работы